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问1、需要做熔解曲线吗?
答:染料法建议每轮扩增后增加熔解曲线步骤(65-95°C),验证扩增特异性、排除引物二聚体与非特异扩增。
问2、引物有什么要求?
答:引物长度 18-25 nt、Tm 58-60°C、产物长度 80-200 bp 为宜,GC 含量 40-60%;建议先做标准曲线验证扩增效率(90-110%)。
SYBR Green qPCR Master Mix(2×)含优化的热启动 Taq 酶、dNTPs、SYBR Green I 荧光染料与校正染料(ROX 可选),特异性好、灵敏度高,线性动态范围宽,适配 ABI、Bio-Rad、宏石等主流荧光定量 PCR 仪,可用于基因表达定量、病原体检测与标准曲线分析。 适用场景:mRNA 表达差异分析、miRNA 定量、病原微生物检测、拷贝数分析。
| 浓度 | 2× 预混液 |
| 检测方式 | SYBR Green I 染料法 |
| ROX 内参 | 预混型 / 独立添加型可选 |
| 动态范围 | 1-10⁹ copies(宽动态范围) |
| 仪器兼容 | ABI、Bio-Rad、宏石、Bioer 等主流 qPCR 仪 |
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